ВЛИЯНИЕ ДИНИТРОЗИЛЬНОГО КОМПЛЕКСА ЖЕЛЕЗА (ДОНОРА ОКСИДА АЗОТА) НА СТРУКТУРУ ХРОМАТИНА И МОРФОЛОГИЮ ФИБРОБЛАСТОВ ЛЕГКИХ ЧЕЛОВЕКА. Акентьева Н.П., Санина Н.А., Абрамова К.А., Гизатуллин А.Ртезисы доклада
Аннотация:ВВЕДЕНИЕ. По данным ВОЗ сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) являются основной причиной смертности во всём мире. В частности, артериальная гипертония является серьезным заболеванием, которое значительно увеличивает риск сердечного приступа, инсульта, почечной недостаточности и слепоты. Современные исследования в области молекулярной кардиологии установили центральную роль монооксида азота (NO) в регуляции сосудистого тонуса и метаболизма миокарда. Сигнальная молекула NO является биорегулятором, опосредующим широкий спектр физиологических и патологических процессов в клетке. NO играет важную роль в защите против возникновения и прогрессии артериальной гипертонии: регулирует тонус мелких и средних кровеносных сосудов, вазодилатацию, способствует расслаблению гладкой мускулатуры, обладает анти-коагулянтными свойствами, ингибирует адгезию моноцитов и тромбоцитов, ингибирует продукцию вазоконстрикторов. Снижение продукции или биодоступности NO является одной из причин дисфункции эндотелия при артериальной гипертонии, кардиомиопатии, сердечной недостаточности. Поэтому синтез новых доноров NO для лечения ССЗ и, в первую очередь, артериальной гипертонии является актуальной задачей. ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Изучить влияние динитрозильного комплекса железа (донора NO) ДНКЖ -[Fe(SC(NH2)(NHC2H5))2(NO)2]Cl[Fe(SC(NH2)(NHC2H5))Cl(NO)2] на структуру хроматина и морфологию фибробластов легких человека.МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ. В работе использованы фибробласты легких человека. Способ культивирования: суспензионный в среде DMEM с 10% телячьей эмбриональной сывороткой при 37оС, 5% СО2. Для окрашивания клеток использовали FITC –фаллоидин и Hoechst. Анализ изменений морфологии клеток и структуры хроматина клеток проводили методом конфокальной микроскопии при длине волны 488 нм, увеличении х40 и х63. РЕЗУЛЬТАТЫ. Результаты исследования показали, что в контрольных образцах (без добавления ДНКЖ) фибробласты имеют обычную морфологию, клетки вытянутой формы, ядра хорошо окрашенные, четко видна структура актина, филаменты фибробластов удлиненные, четко очерченные, цитоплазматическая мембрана клеток не разрушена. Однако, при обработке клеток высокими концентрациями ДНКЖ [4х10-3 М], большая часть клеток имеет округлую форму, ядра плохо окрашены, филаменты практически отсутствуют, актин имеет рыхлую структуру, края клеток неровные, актиновые волокна выглядят деструктированными, цитоплазматическая мембрана частично разрушена. Вероятно, что округлая форма клеток наблюдается в связи с потерей ими адгезивности и развития апоптоза. Это указывает на то, что при высокой концентрации ДНКЖ наблюдаются значительные изменения в морфологии клетки. В то же время, при обработке клеток более низкой концентрацией ДНКЖ [4х10-4 М] видно, что морфология клеток более близка к контрольным, нормальным клеткам. Форма клеток вытянутая, видны окрашенные ядра, но более мелкие, имеются филаменты. Структура актина выглядит более организованной по сравнению с клетками, обработанными высокой концентрацией ДНКЖ. При анализе этих же клеток под большим увеличением (х63) видно, что структура актина состоит из длинных, вытянутых, хорошо организованных волокон. Ядра хорошо окрашены, округой формы. ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Таким образом, показано, что при обработке клеток низкими концентрациями ДНКЖ наблюдаются небольшие изменения в морфологии, структуре актина, форме ядра, структуре филаментов. Вероятно, что эти изменения не являются драматичными для жизнеспособности клеток. Результаты исследования показали, что ДНКЖ при низких концентрациях не проявляет цитостатические свойства и практически не влияет на морфологию клетки и структуру хроматина.Следовательно, ДНКЖ имеет потенциал для лечения сердечно-сосудистых заболеваний (артериальная гипертония, ишемия и др.). Научная работа выполнена в соответствии с госзаданием № АААА-А19-119071890015-6.
